一种直接测定生物样品中未经分离的小核酸的方法及检测试剂盒

基本信息

申请号 CN201310754613.X 申请日 -
公开(公告)号 CN104109708B 公开(公告)日 2015-05-13
申请公布号 CN104109708B 申请公布日 2015-05-13
分类号 C12Q1/68(2006.01)I 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 梁东;崔坤元;陈波 申请(专利权)人 厦门成朴希晟股权投资合伙企业(有限合伙)
代理机构 - 代理人 -
地址 361000 福建省厦门市海沧区东孚翁角西路2036号4层
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种直接测定生物样品中未经分离的小核酸的方法,包括如下步骤:(1)取生物样品;(2)加Ploy?A到小核酸的3’端:3)逆转录反应:加入带一第一引物的寡聚dT及逆转录酶,生成带寡聚T+和设计的第一引物尾的单链cDNA;(4)PCR放大定量小核酸:加入和小核酸序列完全互补或部分互补的第二引物,以及和第一引物完全互补或部分互补的第三引物,之后进行PCR检测定量小核酸的量。本发明无需分离生物样品中的小核酸,而是直接利用生物样品测定其小核酸(如siRNA、miRNA、反义核酸、aptamer)含量。