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一种EBV特异性的细胞毒性T细胞的制备方法

基本信息

申请号	CN202011588232.5	申请日	-
公开（公告）号	CN112626015A	公开（公告）日	2021-04-09
申请公布号	CN112626015A	申请公布日	2021-04-09
分类号	C12N5/0783;C12N5/0781;C12N13/00	分类	生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程;
发明人	吕晓菲;张慧慧;谭毅;李想	申请（专利权）人	山东省齐鲁细胞治疗工程技术有限公司
代理机构	济南泉城专利商标事务所	代理人	牛芳
地址	250101 山东省济南市高新区港兴三路1109号实验楼201室
法律状态	-

摘要

本发明属于细胞生物学技术领域，具体涉及一种EBV特异性的细胞毒性T细胞的制备方法：采用刺激细胞按照不同比例刺激脐血或外周血来源的单个核细胞3周，培养过程中每3天对半更换细胞培养液，维持细胞密度为3.0×10⁶/mL，共刺激培养21天；所述刺激细胞为辐照过的EBV转化的B淋巴细胞，所述单个核细胞与刺激细胞以每周减少的比例进行，即第0天时，单个核细胞与刺激细胞的比例为40:1，第7天为20:1，第14天为5:1，每种比例分别刺激一周，共刺激三周。本发明提供的EBV‑CTL的制备方法，能够快速有效提高扩增效率，体外功能实验表明，EBV‑CTL可以特异性的杀伤EBV感染的细胞，且杀伤效率在90%以上。在临床上，对同种异体干细胞移植后受体的EBV免疫治疗具有重要的潜在意义。