一种提高菊酯类降解酶表达量的方法

基本信息

申请号 CN201610531523.8 申请日 -
公开(公告)号 CN106191002B 公开(公告)日 2019-11-15
申请公布号 CN106191002B 申请公布日 2019-11-15
分类号 C12N9/18;C12N1/21;C12R1/19 分类 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程;
发明人 龙燕妮 申请(专利权)人 浙江杭海新城控股集团有限公司
代理机构 - 代理人 -
地址 431800湖北省荆门市京山市新市镇绿林路12号附1号33户
法律状态 -

摘要

摘要 本发明提供一种提高菊酯类降解酶表达量的方法。即通过制备生产菌种大肠杆菌E.coli BLR(DE3)/pET‑28a‑est825;种子培养;发酵培养:使用乳糖和异丙基硫代半乳糖(IPTG)的混合诱导溶液(摩尔浓度比为7:3)降温至30‑35℃开始诱导,诱导过程中继续流加甘油和酵母粉的混合补料液,维持发酵液中甘油的浓度为1‑2g/L,诱导的时间持续6‑7h;最后将菌体用含有0.005mol/L苯甲基磺酰氟的pH6.5‑7.0的磷酸盐缓冲液配制成质量浓度15%‑20%的菌悬液,超声破碎离心冻干后即得高酶活降解酶酶粉。