胰蛋白酶亲和层析纯化人重组SPINK6蛋白的方法
基本信息
申请号 | CN201110369066.4 | 申请日 | - |
公开(公告)号 | CN103122028B | 公开(公告)日 | 2016-03-30 |
申请公布号 | CN103122028B | 申请公布日 | 2016-03-30 |
分类号 | C07K14/81(2006.01)I;C07K1/22(2006.01)I | 分类 | 有机化学〔2〕; |
发明人 | 黄晋江;赵晓蔚;陆海荣;黄青山 | 申请(专利权)人 | 上海高科联合生物技术研发有限公司 |
代理机构 | 上海元一成知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人 | 复旦大学;上海高科联合生物技术研发有限公司 |
地址 | 200433 上海市杨浦区邯郸路220号 | ||
法律状态 | - |
摘要
摘要 | 本发明公开了一种人重组SPINK6蛋白的亲和层析纯化方法,其包括:将胰蛋白酶与亲和层析介质混合,偶联反应,制得胰蛋白酶亲和层析介质;将人重组SPINK6蛋白通过预先用缓冲液A平衡好的装有所述的胰蛋白酶亲和层析介质的层析柱;然后用缓冲液A清洗上样后的胰蛋白酶亲和层析柱;再用缓冲液B将SPINK6蛋白从层析柱上洗脱,并收集洗脱峰。本发明方法获得的人重组SPINK6蛋白的活性回收率为45-60%,纯度可达90%-95%,蛋白纯化倍数为10-20倍以上。本方法处理速度快、重复性好、柱效长且结合效率基本不变。 |
