胰蛋白酶亲和层析纯化人重组SPINK6蛋白的方法

基本信息

申请号 CN201110369066.4 申请日 -
公开(公告)号 CN103122028B 公开(公告)日 2016-03-30
申请公布号 CN103122028B 申请公布日 2016-03-30
分类号 C07K14/81(2006.01)I;C07K1/22(2006.01)I 分类 有机化学〔2〕;
发明人 黄晋江;赵晓蔚;陆海荣;黄青山 申请(专利权)人 上海高科联合生物技术研发有限公司
代理机构 上海元一成知识产权代理事务所(普通合伙) 代理人 复旦大学;上海高科联合生物技术研发有限公司
地址 200433 上海市杨浦区邯郸路220号
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种人重组SPINK6蛋白的亲和层析纯化方法,其包括:将胰蛋白酶与亲和层析介质混合,偶联反应,制得胰蛋白酶亲和层析介质;将人重组SPINK6蛋白通过预先用缓冲液A平衡好的装有所述的胰蛋白酶亲和层析介质的层析柱;然后用缓冲液A清洗上样后的胰蛋白酶亲和层析柱;再用缓冲液B将SPINK6蛋白从层析柱上洗脱,并收集洗脱峰。本发明方法获得的人重组SPINK6蛋白的活性回收率为45-60%,纯度可达90%-95%,蛋白纯化倍数为10-20倍以上。本方法处理速度快、重复性好、柱效长且结合效率基本不变。