重组KLK14蛋白的纯化方法
基本信息
| 申请号 | CN201110369133.2 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN103122346B | 公开（公告）日 | 2016-01-13 |
| 申请公布号 | CN103122346B | 申请公布日 | 2016-01-13 |
| 分类号 | C12N9/64(2006.01)I | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 黄晋江;葛葵葵;李国栋;黄青山 | 申请（专利权）人 | 上海高科联合生物技术研发有限公司 |
| 代理机构 | 上海元一成知识产权代理事务所（普通合伙） | 代理人 | 复旦大学;上海高科联合生物技术研发有限公司 |
| 地址 | 200433 上海市杨浦区邯郸路220号 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 本发明公开了一种重组KLK14蛋白的亲和层析纯化方法，包括步骤：(1)将重组SPINK6蛋白与亲和层析介质混合，偶联反应，制得重组SPINK6蛋白亲和层析介质；(2)将重组KLK14蛋白通过预先用缓冲液A平衡好的装有步骤(1)的SPINK6蛋白亲和层析介质的层析柱；然后用缓冲液A清洗上样后的重组SPINK6蛋白亲和层析柱；再用缓冲液B将重组KLK14蛋白从层析柱上洗脱，并收集洗脱峰。本发明方法获得的重组KLK14蛋白的活性回收率为50-65％，纯度可达85％-90％，蛋白纯化倍数为10-20倍以上。本发明方法处理速度快、重复性好、柱效长且结合效率基本不变。 |
