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KLK14蛋白亲和层析纯化人重组SPINK6蛋白的方法

基本信息

申请号 CN201110369655.2 申请日 -
公开（公告）号 CN103122029B 公开（公告）日 2015-10-28
申请公布号 CN103122029B 申请公布日 2015-10-28
分类号 C07K14/81(2006.01)I;C07K1/22(2006.01)I 分类 有机化学〔2〕;
发明人 陆海荣;黄晋江;李斌宾;黄青山 申请（专利权）人 上海高科联合生物技术研发有限公司
代理机构 上海元一成知识产权代理事务所（普通合伙） 代理人 复旦大学;上海高科联合生物技术研发有限公司
地址 200433 上海市杨浦区邯郸路220号
法律状态 -

摘要

摘要 本发明公开了一种人重组SPINK6蛋白的亲和层析纯化方法，包括：将人重组KLK14蛋白与亲和层析介质混合，偶联反应，制得人重组KLK14蛋白亲和层析介质；将人重组SPINK6蛋白通过预先用缓冲液A平衡好的装有上述的胰蛋白酶亲和层析介质的层析柱；然后用缓冲液A清洗上样后的人重组KLK14蛋白亲和层析柱；再用缓冲液B将SPINK6蛋白从层析柱上洗脱，并收集洗脱峰。采用本发明的方法，人重组SPINK6蛋白的活性回收率为45-60％，纯度可达90％-95％，蛋白纯化倍数为10-20倍以上。本发明方法处理速度快、重复性好、柱效长且结合效率基本不变。