双鼠李糖脂生产菌株、构建方法及其应用
基本信息
| 申请号 | CN202010924374.8 | 申请日 | - |
| 公开（公告）号 | CN112941001A | 公开（公告）日 | 2021-06-11 |
| 申请公布号 | CN112941001A | 申请公布日 | 2021-06-11 |
| 分类号 | C12N1/21;C12N15/90;C12N1/38;C12P19/44;C12R1/385 | 分类 | 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程; |
| 发明人 | 陈玲;汪江林 | 申请（专利权）人 | 上海恒什生物科技有限公司 |
| 代理机构 | 上海科律专利代理事务所（特殊普通合伙） | 代理人 | 叶凤 |
| 地址 | 200131 上海市浦东新区富特北路288号4幢楼6层6C室 | ||
| 法律状态 | - | ||
摘要
| 摘要 | 双鼠李糖脂生产菌株、构建方法及其应用。以铜绿假单胞菌PAO1菌株作为出发菌株，利用同源重组的方法分别将其自身rhlAB基因簇的启动子替换为阿拉伯糖诱导型启动子，rhlC基因启动子替换为菌株生长稳定期诱导的启动子，获得了一株能够专一性生产双鼠李糖脂的铜绿假单胞菌菌株PD2；该基因工程重组菌株PD2利用市售的金龙鱼葵花籽油作为底物制备双鼠李糖脂的浓度达到35.2g/L，纯度达到91.27％，其中Rha‑Rha‑C10‑C10的比例最大，占比为65.43％。进一步结合随机诱变，筛选出一株双鼠李糖脂生产水平显著提高的突变菌株PD08。该突变菌株利用市售的金龙鱼葵花籽油作为底物，在5L的生物反应器中，于37℃发酵90小时，双鼠李糖脂的浓度达到65.0g/L，纯度达到94.53％，其中Rha‑Rha‑C10‑C10的比例最大，占比为73.91％。 |
